当抗体验证图也开始被质疑:做 WB 的人,真正需要守住的是第一张原图

内容摘要: 商业抗体验证图像出现大规模争议,并不等于相关抗体都已被证实无效。对真正做 Western Blot(WB)的人来说,更现实的问题是:当一次实验失败时,手里的记录能否帮助自己判断,问题出在抗体、样品、转膜、曝光,还是后处理?本文提供一份新抗体预验证与原图留存清单,并说明 Touch Imager 与数据钢印如何在图像采集和数据追溯环节提供支持。

事实边界: 本文依据截至 2026 年 8 月 27 日可查的公开资料撰写。文中提及的调查数据库属于持续更新的线索记录,其中被标记的图像不能直接等同于抗体产品无效,也不能替代逐项、独立的实验核查。本文不对任何抗体品牌作性能定性或问题率排名。

一张 Western Blot 图出了问题,究竟应该先怀疑抗体,还是先检查自己的实验?

对于真正做过 WB 的人来说,这个问题并不好回答。

抗体可能不适合当前应用,样品可能降解,转膜可能不充分,一抗浓度可能过高,曝光可能已经饱和;最终用于组会或投稿的图片,也可能经过裁剪或调整,已经很难与第一次采集的原始文件对应起来。

最近发生的一场商业抗体验证图像争议,让这个原本隐藏在实验流程里的问题重新摆到了台面上。

超过 18,000 张图像被标记,真正值得关注的是什么?

Nature:超过 18,000 张抗体验证图像被标记,涉及15家公司

《Nature》2026 年 8 月 25 日的报道称,一项针对商业抗体目录验证数据的调查标记了超过 18,000 张值得进一步核查的图像,涉及 15 家公司的抗体目录。报道提到的问题包括疑似重复、拼接及其他可能经过大量编辑的图像模式。调查者同时公开了一个持续更新的资料库,供外界查看相关线索。

Zenodo:调查者公开的原图、标注图和汇总数据库

但这里有一个必须守住的事实边界:

验证图像存在疑点,不意味着对应抗体一定无效。

《Nature》的报道也明确指出,图像被编辑并不能自动推出底层产品存在缺陷;数据库中的条目同样不能简单视为已经完成独立实验验证的最终结论。ref-1

所以,对普通科研人员来说,这件事真正值得警惕的,不只是“以后该买哪个品牌”,而是另一个更加现实的问题:

当一次 WB 失败时,我手里有没有足够的信息判断,问题究竟出在哪里?

一个常见的 WB 场景:同一支抗体,为什么这次“不工作了”?

设想这样一个实验场景。

你新买了一支抗体。官网上的验证图片条带清楚,目标分子量正确,背景干净。你按照说明书做了第一次实验,目标位置有条带,但背景偏高。

你调整了一抗浓度,又做了一次。这一次背景降低了,目标条带却也变弱了。

第三次,你重新制样、重新转膜,终于得到一张看起来不错的结果。

几周后,导师问:“第一次和第三次到底改了什么?”

这时候才发现:

  • 第一次曝光用了什么设置,没有记录;
  • 第二次对应哪张原始图,已经找不到;
  • 第三次为了做汇报,图片裁剪过;
  • 文件夹里只剩下 final.tiffinal2.tiffinal_new.tiffinal_new2.tif

真正的问题出现了。

不是实验一定做错了,而是我们已经很难回到实验发生的那个时间点。

WB 最怕的,不只是失败,而是失败以后无法解释

Western Blot 是一条由多个环节串起来的实验链:

样品 → 电泳 → 转膜 → 封闭 → 抗体孵育 → 洗膜 → 显色或发光 → 图像采集 → 图像处理 → 数据展示

任何一个环节发生变化,最后呈现出来的条带都可能不同。因此,当你看到一张“不对劲”的 WB 图时,至少需要回答以下问题:

  • 抗体是否适合当前应用和样本类型?
  • 样品中是否表达目标蛋白,样品状态是否正常?
  • 上样量和转膜是否一致、充分?
  • 一抗、二抗浓度是否合适?
  • 曝光是否进入饱和区?
  • 现在看到的是原始采集图,还是处理后的版本?
  • 同一张膜是否保留了其他曝光条件下的原始结果?

如果这些信息没有留下来,即使重新做实验,也很难判断自己是在验证一个假设,还是又一次从头碰运气。

Nature Research Figure Guide 的图像完整性指南要求,最终图像应正确呈现原始数据;用于最终图中的凝胶或 blot 应提供原始、未经裁剪的数据,局部拼接需要清楚标示,调整也不应使条带或其他信息消失。Nature Portfolio 的图像完整性与标准政策还指出,研究者应保留未经处理的数据和元数据,并记录关键采集设置与处理操作。

对科研人员而言,这不只是投稿前才需要处理的格式问题。它首先是一种实验习惯:

先把实验真实发生过什么保存下来,再讨论这张图是否适合展示。

抗体到货后,先问自己三个问题

面对抗体验证信息争议,比起陷入“哪个品牌一定可靠”的讨论,一个实验室更实际的做法,是在购买和使用抗体时增加三个判断。

1. 供应商有没有针对我的应用场景做验证?

“这个抗体有验证数据”和“这个抗体适用于我的实验”是两回事。

抗体验证应当与具体应用相匹配。国际抗体验证工作组提出的“五大支柱”框架,也强调要根据具体应用,结合基因敲除或敲低、正交方法、独立抗体、标签蛋白表达等策略验证抗体。ref-3

购买前可以尽量确认:

  • 是否针对 Western Blot 做过应用验证;
  • 验证物种、样本类型是否与自己的实验接近;
  • 理论分子量与验证条带是否对应;
  • 是否说明阳性、阴性或 KO/KD 等验证依据;
  • 是否提供足够完整的实验条件与图像信息。

验证信息越接近自己的实验场景,越有助于减少无目的的试错。

2. 我看到的是漂亮的结果图,还是能够判断实验质量的数据?

一张裁剪得很漂亮的单条带图片,能够告诉我们的信息其实很有限。

如果条件允许,更值得关注的是:

  • 能否看到完整膜或未经裁剪的图像?
  • 是否保留 Marker?
  • 是否能看到其他非特异性信号?
  • 是否提供不同曝光条件或必要对照?
  • 图片能否与明确的样品、条件和实验记录对应?

这些信息往往比“最终图是否漂亮”更有助于判断一项验证证据是否适合自己的实验。

3. 如果三个月后出现争议,我还能不能找到今天的原始数据?

这一点经常被忽略。

不少实验室实际的数据流转方式仍然是:

拍完 → 导出 → 改文件名 → 发到聊天软件 → 做进 PPT。

当实验量变大以后,问题很快就会出现:

  • 哪张图属于哪个样品?
  • 什么时候采集的?
  • 原始图在哪里?
  • 是否重新曝光过?
  • PPT 里的图片来自哪个原始文件?

如果这些关系只能依靠实验人员的记忆维持,那么在人员变动、项目周期拉长或论文进入投稿阶段以后,追溯成本就会迅速升高。

Touch Imager 想解决的,不只是“把 WB 拍下来”

Touch Imager电子压片成像仪

很多人选择 Western Blot 成像设备时,第一个关注的问题通常是:“能不能把结果拍清楚?”

这当然重要。

但当实验进入论文撰写、项目验收、数据复核和长期积累阶段以后,第二个问题会越来越重要:

这张图以后还能不能被准确找到和解释?

Touch Imager 所处的是 WB 图像采集环节。对实验人员来说,设备的价值不应只停留在“得到一张用于展示的图片”,还应该延伸到实验数据产生的第一现场。

因为从图像采集完成的那一刻开始,这张图就进入了更长的数据生命周期:

原始图 → 分析图 → 统计结果 → 组会 PPT → 文章 Figure → 补充材料

越往后,文件和版本越多,人与原始数据之间的距离也越远。与其在最后阶段重新证明“这张图从哪里来”,更实际的做法是从数据产生时,就把应该留下的信息留下来。

数据钢印:不是“抓造假”,而是帮助数据找到来路

新华网:e-BLOT发布数据钢印

这里需要特别说明:

数据钢印不是图像造假识别器。

它不能替研究者判断一支抗体是否可靠,也不能仅凭一张图片判断实验是否涉及科研不端。

在本文中,数据钢印指与 Touch Imager 图像采集流程配套的附加功能。按照易孛特公开的产品说明,它在图像采集时为文件生成唯一数字标识,并关联采集时间、设备信息及相关记录;后续操作与原始数据之间也可形成记录关系,帮助研究者回看数据来源和处理路径。

它更适合承担的是另一件事:

在实验数据产生时,把图像文件与相应信息建立关联,为后续的数据复核和追溯提供依据。

科研诚信不能依赖一个软件按钮来保证。可靠的数据体系仍然来自:

规范实验 + 原始采集 + 信息记录 + 文件关联 + 可追溯管理。

数据钢印的作用,是尽量把“记录”和“关联”提前到数据产生阶段。

这样,当几个月以后有人问“论文 Figure 3B 的这个条带,原始图在哪里”,实验人员不必只依靠记忆翻找多个硬盘、聊天记录和 PPT,而是可以沿着已有的数据关系,回到相应的原始图像和实验记录。

为什么采集时建立关联,比事后补记录更重要?

科研人员都知道实验应该记录。但真正的问题是:记录发生在什么时候?

如果实验结束几天后再整理,很多细节已经开始丢失;如果等到论文准备投稿时才重新寻找原始图,可能已经过去一年甚至更久。

而相对完整的信息,往往存在于数据刚刚产生的那个时刻。

因此,数据完整性管理不应该从投稿时才开始,而应该从第一次采集开始。

Touch Imager 与数据钢印的组合价值也在这里:前者承担图像采集,后者帮助图像在产生时建立更清晰的文件关联和追溯记录。它们不能替实验人员做科研判断,但可以尽量减少一种很可惜的情况:

实验做了,数据也有价值,却因为原始文件和实验信息没有保存好,最后说不清楚。

抗体到货后,先别急着跑整板:一份 WB 验证与原图留存清单

如果准备购买或更换一支新的 WB 抗体,可以先完成下面的检查。

抗体购买前

  • 确认抗体是否针对 Western Blot 做过应用验证
  • 核对验证物种、样本类型和目标蛋白理论分子量
  • 尽量查看完整膜、未经裁剪图像或更完整的验证信息
  • 关注是否具有阳性、阴性、KO/KD 或其他应用特异性验证依据
  • 不单纯依据一张“漂亮条带图”判断抗体性能

第一次实验

  • 先进行小规模预实验,避免直接消耗整批珍贵样品
  • 设置必要的阳性、阴性或内参对照
  • 保留 Marker 和完整膜信息
  • 尝试合适的曝光范围,不只保存一张“最终图片”
  • 保存未经裁剪的原始图像

图像采集后

  • 原始文件不被处理图覆盖
  • 建立样品、膜、实验日期和图像之间的对应关系
  • 记录关键实验条件、采集信息和处理步骤
  • 确保最终 Figure 能够回溯到原始数据
  • 在项目结束前定期检查数据是否仍可完整打开和追溯

这套流程不会让每一支抗体都变得可靠,但它能帮助你更快回答一个关键问题:

到底是哪一步出了问题?

常见问题 FAQ

抗体验证图片存在争议,是否意味着相关抗体都不能用了?

不是。验证图像存在疑似重复、拼接或其他异常,需要进一步核查,但不能据此直接认定对应抗体一定无效。应当区分“验证证据存在争议”和“产品性能已经被独立实验确认无效”。ref-1

做 Western Blot 为什么要保留未经裁剪的原始图?

因为完整原图可以保留 Marker、背景、非特异性条带以及泳道之间的整体关系,为结果复核、投稿和后续数据追溯提供更多依据。不同期刊的具体要求可能不同,投稿前仍需查阅目标期刊的最新作者指南。ref-4

数据钢印能判断 WB 图片有没有造假吗?

不能,也不应该这样理解。数据钢印的核心价值是帮助原始图像与采集信息建立关联,让数据来源和处理路径更便于追溯,而不是自动判断科研不端。

Touch Imager 能解决抗体不特异的问题吗?

不能。抗体特异性受到抗体本身、样品、实验体系和实验条件等多方面因素影响。Touch Imager 所处的是图像采集环节,其作用是帮助研究者获得并留存实验图像,为问题排查提供可回看的原始依据。

一套好的 WB 数据管理流程,最重要的是什么?

不是把最终图片保存得多漂亮,而是确保:

最终结论能够回到原始实验,最终 Figure 能够回到原始图像。

从“得到一张图”,到“留下一份可以被复核的数据”

抗体验证图像争议或许还会继续发展。调查数据库可能更新,供应商也可能陆续发布回应、更新验证页面或补充说明。在获得正式确认前,不宜对品牌作笼统定性。

但对于每天真正站在实验台前的人来说,我们没有必要等行业给出最终答案,才开始改善自己的实验流程。

因为无论抗体来自哪家公司,无论最后投稿哪一本期刊,有一件事始终不会改变:

真正属于你的科研证据,是自己实验产生的原始数据。

一张 WB 图片最大的价值,不只是今天能够放进 PPT,而是半年以后、一年以后,当导师、合作者、审稿人,甚至未来的自己再次问起这组实验时,你仍然能够清楚地回答:

  • 这是哪一次实验;
  • 这是哪一个样品;
  • 这是当时采集下来的原始结果;
  • 现在看到的结论,可以怎样一步一步回到它的数据来源。

这也是 Touch Imager 与数据钢印希望帮助实验室解决的问题:

不仅把 Western Blot 图像采集下来,也让每一次实验结果更有迹可循。


参考资料

  1. Garisto, D. More than 18,000 questionable images found in antibody catalogues of 15 companies. Nature, 2026-08-25. DOI: 10.1038/d41586-026-02635-w。用于支持争议的报道时间、报道口径及“图像异常不自动等同于产品无效”的事实边界。
  2. Richardson, R.; David, S. Problematic images in vendor antibody verification data. Zenodo, 2026-08-25 版,访问日期:2026-08-27。该资料库会持续更新,其中条目为调查线索,不代表已完成逐项独立实验核查。
  3. Uhlen, M.; Bandrowski, A.; Carr, S.; et al. A proposal for validation of antibodies. Nature Methods 13, 823–827 (2016). DOI: 10.1038/nmeth.3995。用于支持抗体应按具体应用进行验证,以及遗传学、正交方法、独立抗体等验证框架。
  4. Nature Research Figure Guide. Image Integrity. 访问日期:2026-08-27。用于支持凝胶与 blot 原始、未经裁剪数据及图像处理的相关要求。
  5. Nature Portfolio. Image integrity and standards. 访问日期:2026-08-27。用于支持未经处理数据、元数据、采集设置与图像处理记录的留存建议。不同期刊要求可能不同,请以目标期刊最新作者指南为准。
  6. 易孛特 e-BLOT. 《易孛特上线「数据钢印」:为每一张 WB 图建立从源头可追溯的数字签名》,2026-08-04,访问日期:2026-08-27。用于说明 Touch Imager 与数据钢印的公开功能描述;产品能力与实际配置以易孛特最新官方资料为准。

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